產(chǎn)品屬性
產(chǎn)品簡介
FFPE DNA Kit可從福爾馬林固定石蠟包埋組織切片(以下簡稱FFPE)中提取DNA。由于固定和包埋的條件限制， FFPE樣本核酸通常發(fā)生片段化并且會被甲醛化學(xué)修飾，因此較難提取。試劑盒采用無毒型的脫蠟試劑代替經(jīng)典的二甲苯脫蠟過程，并在脫蠟過程中無需去除液體，減少微量樣品丟失的風(fēng)險。本試劑盒提取的DNA可應(yīng)用于PCR等下游試驗。
試劑盒組成
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產(chǎn)品編號
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D1701
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D1705
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D1706
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D1707
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次數(shù)
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20
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50
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100
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200
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純化柱子
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20
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50
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100
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200
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收集管
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20
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50
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100
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200
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Buffer FL1
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4ml
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28ml
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55ml
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105ml
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Buffer FL2
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6ml
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15ml
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30ml
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55ml
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Buffer BL
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6ml
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15ml
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30ml
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55ml
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Buffer WB
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12ml
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33ml
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55ml
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110ml
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DNA Wash Buffer
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6ml
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13ml
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26ml
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26ml*2
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Proteinase K*
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0.5ml
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1.05ml
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2.1ml
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2.1ml*2
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說明書
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1
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1
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1
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1
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*Protease K含有50%甘油，吸取時，移液器不能伸得太入，以免吸頭外壁帶走Protease K
儲存和穩(wěn)定性
室溫保存，12個月內(nèi)有效。Buffer FL2與Buffer BL可能有沉淀產(chǎn)生，37℃水浴溶解后即可。Proteinase K常溫運輸，-20℃保存。
實驗前準(zhǔn)備
請詳細(xì)閱讀該手冊并熟悉各個步驟，在開始之前準(zhǔn)備好所有的試劑盒組分和必需的器材。
濃縮的DNA Wash Buffer需用無水乙醇按如下稀釋：
D17101 加24ml；D1705加入52 ml ；D1706與D1707每瓶加入104 ml 無水乙醇
需自備器材
無水乙醇 1.5ml離心管 水浴 離心機
操作步驟
1. 樣本處理
A. 石蠟切片：取石蠟切片（5-10μm厚，1×1cm2大小）5-8張。
B. 石蠟塊：手術(shù)刀刮取約30mg的組織樣本（盡量去除多余的石蠟）。
注意：如果樣品表面暴露于空氣中，最初刮取的2-3片棄掉不用。
C. 福爾馬林等固定液中的樣本：取30mg樣本，用手術(shù)刀切為數(shù)塊,置于1.5ml離心管中,加入
500μl PBS渦旋振蕩混勻12000rpm室溫離心1min,重復(fù)3次。跳過第二、三步，從第四步起繼續(xù)操作。
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